不同病种采取不同的标本，如痰、脓液、血液、脑脊液等。涂片经革兰氏染以后镜检，根据典型的革兰氏色阳性具有荚膜的双球菌存在，即可作出初步诊断痰或脓液直接划线接种于血琼脂平板上，37℃孵育24小时后，挑取α溶血的可疑菌落，作菊糖发酵试验、胆汁溶菌和奥普托欣（Optochin,ethylhydrocupreine）敏感试验进行鉴别。发酵菊糖、被胆汗溶解，对optochin敏感者，则多数为肺炎球菌。脑脊液标本须先经血清肉汤增菌后，再接种于血平板。含菌量少或杂菌较多的标本，可接种小白鼠腹腔，18～24小时后，当小白鼠发病濒死时，取心血或腹腔渗出液接种血琼脂平板。菌型鉴定可用凝集试验、沉淀试验和荚膜肿胀。