血清中胆固醇包括CE和FC，酯型的CE占70％，游离型FC占30％。FC中的C3的-OH在LACT作用下，可分别与亚油酸（43％）、油酸（24％）、软脂酸（10％）、亚麻油酸（6％）、花生四烯酸（6５）、硬脂酸（3％）等脂肪酸结合而成。血清中胆固醇在LDL中最多，其次是HDL和VLDL，CM最少。血清总胆固醇测定方法分为化学法和酶法两大类。

⒈化学法化学法一般包括：①抽提；②皂化；③毛地黄皂苷沉淀纯化；④显色比色四个阶段。代表性的方法有Sperry-Webb法，包括①到④步骤操作过程，常规操作中多省去了②、③。或者用省去②、③步骤的Zak-Henly法及省去③步骤的Abell-Kendall法，现将此法作为标准参考方法予以利用。

⒉酶法测定CE在胆固醇酯酶（cholesterolesterase,CHE）作用下水解成FC和FFA，FC再经胆固醇氧化酶（cholesteroloxidase，COD）氧化成△4胆甾烯酮和H2O2，再分别定量O2的消耗或者H2O2的生成量，或者△4胆甾烯酮生成量，以作为FC的定量依据。该法是目前常规应用方法，快速准确，标本用量少，便于自动生化分析器作批量测定。