㈠血清甲状腺激素测定

前已提及，T3、T4在血中均99％以上和TBG等血浆蛋白结合，游离部分更能可靠反映甲状腺激素的生物活性，因此，血清甲状腺激素测定包括总T3（TT3）、总T4（TT4）、游离T3（FT3）和游离T4（FT4）测定。此外，为排除血浆蛋白结合率改变的影响，尚有测定甲状腺激素结合比值（131I-T3树脂摄取率）、游离T4、T3指数等方法。

⒈血清TT4、TT3及FT4、FT3测定 由于即便TT4、TT3在血液中亦仅微量存在，T4、T3本身又具有一定抗原性，因此对四者的检测目前均用免疫化学法。TT3、TT4早期多用125I标记T3或T4的放射免疫法测定，现在用多相酶联免疫法（ELISA）、均相酶放大免疫法（EMIT）及数种荧光免疫法分别测定血清TT4或TT3的技术已广泛应用，并能实现自动化检测。测定FT4、FT3以平衡透析前后免疫化学测定法为标准参考方法，但本法耗时且成本高。在临床实验室中采用的是非透析免疫化学测定。在测定TT4、TT3时，血清需用8-苯胺-1-萘磺酸（ANS）及巴比妥缓冲液等预处理，使与血浆蛋白结合的T4、T3解离出再测定。FT4或FT3抗体结合的标记T4或T3类似物法；亦有采用抗体标记法；还有将相应抗体固定于测定池壁上，待血清中FT4或FT3与其结合后，除去血清再加入标记FT4或FT3，根据竞争性结合原理，测定血清中FT4或FT3的“两步法”。

血清TT4、TT3浓度受血中TBG水平影响。TBG正常者，不同年龄段TT4及TT3水平亦有较大差异，其正常值参考范围见表12-1。

FT4及FT3由于血清浓度甚低，受检测方法、试剂盒质量、实验室条件等的影响显著，文献报告正常值差异大。FT4平均为19-30pmol/L（1.5-3ng/dl），FT3为6.0-11.4pmol/L（0.39-0.74ng/dl）。

血清TT4、TT3及FT4、FT3在甲亢和甲减的诊断、病情严重程度评估、疗效监测上均有价值。但影响上述指标的因素较多，除测定中的各种因素外，还受血浆TBG浓度、多种非甲状腺功能紊乱疾病、抗甲亢药或甲状腺激素治疗等的影响。正常成人血清TBG浓度为15-34mg/L，当TBG升高或降低时，TT4、TT3亦相应升高或降低。雌激素及含雌激素避孕药、病毒性肝炎、妊娠、遗传性高TBG症等时，血清TBG增多；而雄激素、糖皮质激素、肾病综合征、各种原因致蛋白营养不良及应激状态等，均可使血清TBG减少。而严重心、肝、肾疾患，使用抗心律失常药乙胺碘呋酮等脱碘酶抑制剂，可因影响T4在外周组织脱碘代谢成T3及rT3，使TT4、FT4升高，TT3、FT3减少，T3/T4比值下降。此外，各种影响血浆白蛋白浓度的因素，除可改变T4、T3与白蛋白结合率外，尚可因TT4及TT3免疫法测定的抗体，系用T3或T4与白蛋白结合后免疫动物制取的，故亦可影响测定。因此，在评价甲状腺激素测定结果时，应考虑上述因素的影响。从理论上讲，FT4及FT3，特别是后者，较少受影响TBG浓度及T4脱碘为T3因素干扰，且为甲状腺激素能发挥生物效应的主要形式，更有意义。但由于前述影响FT4、FT3测定可靠性原因及未普遍开展，故临床仍多用TT4及TT3测定。为减少TBG改变时TT4、TT3测定结果的影响，可考虑采用下列方法校正。

表12-1　不同年龄血清TT4、TT3正常参考值