要了解此问题，应注意温度对酶活性影响的双重性。首先，化学速度随温度升高而加快，酶反应也不例外。Q10值即温度增加10℃，化学速度的变化率。酶的Q10值约在1.5-2.5之间。

温度与反应速度之间关系，可用Arrhenius方程式来表示：

Logk＝－E/2.303RT+常数

式中k是反应常数，T为绝对温度，R为气体常数。E为活化能也是常数。在酶反应中V＝K·[E]。所以在酶反应中，LogV和1/T作图为一直线，斜率为－E/2.303R。通过每一直线斜率不难计算出该酶反应的活化能E。

但是，测定酶时都需要酶和底物在一定温度下作用一段时间，在此期间，温度有可能使酶失活，不同酶在此方面差异很大，有些酶如胎盘碱性磷酸酶在56℃放置15分钟，活性也不下降，有些酶如酸性磷酸酶，37℃1小时后，失去50％酶活性。酶的稳定性还与其它因素，如作用时间、pH、有无底物、有无其它蛋白等有关。同为碱性磷酸酶，在肝提取液中远不如血清中稳定，37℃作用15分钟后肝中此酶活性将显著下降。又如将血清pH降低在pH6.0以下，血清中酸性磷酸酶将长期稳定。