临床生化方法按其传统分类可分为光谱法、层析法、电泳法、酶法、电化学法、分子生物学和免疫化学法等，这些方法的建立首先要根据其技术的原理（详见前面有关章节）和被测物质的物理化学性质来确定其方法建立的原理，例如亮度法测定的对象是各种有色物质，有色物质溶液的颜色深浅与其浓度有一定的关系，浓度大时色深，浓度小时色浅，比较颜色的深浅即可测知待测物质的浓度。为此，首先要知道待测物质本身是否有色，若本身无色，能与何种物质在什么条件下呈色，弄清后即可与一已知浓度的标准品作比较，然后分别测出两者的吸亮度，从郎伯-比耳定律可得知：