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二、实验方法的评价

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(一)重复性试验

目的在于考察候选方法的随机误差,重复性试验的方法是对同一材料分成数份试验样品,进行多次分析测定。

⒈试验形式与方法 ①批内重复性试验:可以用同一份标本在相当短的时间内,按规定的操作方法,在较稳定的条件下,作多次(一般为20次)重复性测定。计算其X、S与CV。不同性质的分析对CV值的要求不同,一般应小于5%,精密的分析或多次平行测定,要求小于2%。②天内重复性试验:在一天内对一个或数个标本作数批重复测定,其它条件和批内相同,但因在一天内重复测定几批,所受影响因素要比批内多,所得的CV值可能比批内大一些。③天间重复性试验:将同一标本每天一次随机插入常规标本中测定,连续20个工作日,这样得到的CV值比上述批内与天内大,能反映实际工作的情况。④病人标本的平行双份测定:如不易得到含有合适基质的稳定样品(如作血液pH的重复性测定的标本),可采用病人标本的双份测定来代替重复性试验,选择一批病人标本(20至100份),待测物浓度应在实验方法的分析范围内,有高有低;记录标本的特性,如有某种药物、混浊、溶血或有尿毒症等,可影响其准确性。可作一批或几批分析,但每一标本都平行做两份,用双份分析结果之差(d)来计算S(∑d/2N)作为不精密度的指标。

⒉分析样品的选择作重复性试验的样品,应用标准液、控制物溶液、病人标本或混合血清均可,视其用途而定。作批内重复性试验,用标准液可以得到各种不同浓度,较简便,它代表了最好的重复性性能。若结果良好,说明方法操作是适宜的,再进一步用其它样品进行测定。在进行天间重复性试验时,用冻干质控血清较好,因其稳定、方便。其它样品进行测定。在进行天间重复性试验时,用冻干质控血清较好,因其稳定、方便。

⒊分析物浓度的选择进行重复性试验时被测物浓度,宜选择在医学上具有决定性意义的浓度进行试验,因为这种浓度在临床分析实验结果时最有用处。

(二)回收试验

所谓回收即分析方法正确测定加入常规分析样品中的纯分析物的能力。目的是测定比例系统误差,以衡量候选方法的准确度。

⒈方法将被分析的纯品标准液加入病人样品中,成为分析样品,原病人样品加入相同量的无分析物的溶液作基础样品,然后用实验方法分析,两者测定结果的差值为回收量。

⒉回收率计算 以测定血清钙为例说明如下:

⑴样品制备

1)基础样品:血清2ml+蒸馏水0.1ml;

2)分析样品:血清2ml+4mmol/L钙标准液0.1ml;

3)分析样品:血清2ml+25mmol/L钙标准液0.1ml;

⑵计算公式及计算结果

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