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一、酶扩大免疫测定技术
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酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的均相酶免疫测定方法,是由美国Syva公司研究成功并定名的。此法主要检测小分子抗原或半抗原,在药物测定中取得较多应用。酶扩大免疫测定技术(enzyme-multipliedimmunoassaytechnique,EMIT)试剂盒的商标取名为EMIT。
EMIT的基本原理是半抗原与酶结合成酶标半抗原,保留半抗原和酶的活性(图15-2B)。当酶标半抗原与抗体结合后,所标的酶与抗体密切接触,使酶的活性中心受影响而活性被抑制(图15-2A)。EMIT试剂盒中的主要试剂为:①抗体,②酶标半抗原,③酶的底物。检测对象为标本中的半抗原。当试剂①、②与标本混合后,标本中的半抗原与酶标的半抗原竞争性地与试剂中的抗体相结合。如标本中的半抗原量少,与抗体结合的酶标半抗原的比例增高,游离的具有酶活力的酶标半抗原的量就减少。因此在反应后酶活力大小一标本中的半抗原呈一定的比例,从酶活力的测定结果就可推算出标本中半抗原的量。
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