（1）组织切片脱蜡入水，0.01mol/l pH7.4 PBS洗；

（2）用4%正常羊血清封闭组织37℃ ，30min。

（3）分别以第一抗体孵育组织，4℃24h，PBS振洗10min×3；

（4）用胶体铁标记的第二抗体37℃孵育30min或用桥抗联接胶体铁标记物；

（5）蒸馏水洗；

（6）以1%的亚铁氰化钾与1%盐酸混合液显色20in；

（7）自来水洗 ；

（8）核固红染核，脱水，透明、封片。

以该方法染色，阳性为蓝色，胞核为红色。