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四、对照试验
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为确定方法的特异性,免疫电镜技术也需进行对照试验(同第一章 )。
总之,不论哪一种免疫电镜技术都面临微细结构的保存和组织中抗原活性的保存这一对矛盾,如戊二醛、锇酸等固定液有利于微细结构的保存,但对抗原活性有影响,而H2O2能增加树脂穿透性,但对微细结构有损伤,能使反应部位产生孔洞。在生物样品处理过程中,应同时注意到这两个方面。其次,每次免疫染色中的清洗工作应注意彻底,否则非特异性产物和其他污染物会影响特异性反应产物的显示和观察。根据作者经验,以塑料水壶加锥形喷水头喷洗,与镍网面成平行方向,即顺网面喷洗,较之目前通用的杯水洗涤法易于达到清洁目的。冲洗的残留水滴以滤纸吸干时,应注意不要触及载网本身。可将滤纸剪成三角形,以尖端接触水滴,即可达到吸干水份的目的,整个过程中,必须应用双蒸水,容器应专用。
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