中医书籍-->西医备考-->实用免疫细胞与核酸-->第七章 电子显微镜免疫细胞化学技术-->第三节 免疫酶细胞化学技术-->二、电镜标本制备方法-->2.组织切片酶标记抗体染色法

2.组织切片酶标记抗体染色法

大字体 | 正常字体 | 简体 | 正體
分享到:

免责声明:本文来自互联网,文章内容仅供参考!

(1)1mm厚组织块,在4℃下用固定液固定后,置于含4.5%的蔗糖PBS(0.05mol/l pH7.2),4℃中漂洗,换数次固定液,过夜。

(2)随后,作10~40μm的冰冻切片,放入第一抗体血清作用12~18h,4℃,用含蔗糖的PBS洗数次。

(3)置于HRP标记抗体液(第二抗体)4℃过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4℃浸漂过夜。

(4)2.5%戊二醛(pH7.4磷酸缓冲液)再固定1h,4℃用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛,每次5min,共洗3次。

(5)DAB-H2O2显色15~30min。

(6)0.05mol/l PBS冲洗3次,每次30min,再置于室温中用1%~2%锇酸固定1h,脱水、包埋、切片复染和观察。

注意:本文来自互联网,并由中医村中医网负责收集整理!转载请注明出处!

评论: