中医书籍-->西医备考-->实用免疫细胞与核酸-->第十五章 自身抗体的免疫组织化学检测方法和应用-->第二节 在研究和诊断自身免疫性疾病中的应用-->十四、抗皮肤成分自身抗体的检测
十四、抗皮肤成分自身抗体的检测
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抗皮肤成分的自身抗体在疱疹性皮肤病中具有诊断和鉴别诊断意义,寻常性天疱疮具有鳞状上皮细胞间隙抗体,类天疱疮具有基底膜带抗体。这种自身抗体无种属特异性。用直接免疫荧光法检测皮肤活检组织,间接法可用以检测病人血清中的抗皮肤成分抗体。
1.抗原切片直接法免疫荧光细胞化学检查,可以取病人皮肤活检组织作冰冻切片。
间接法检查常用大白鼠,豚鼠的食道上1/3部分作冰冻切片。也有人曾用猴、人、小白鼠和兔的食道上皮组织,人的正常皮肤,大白鼠、猴、豚鼠和兔唇和舌等作冰冻切片。认为人正常皮肤,小白鼠食道和大白鼠舌,可作为常用抗原,材料来源方便,经济,易推广应用。
2.免疫荧光细胞化学染色方法
(1)直接法:取病人皮肤活检组织一部分作常规石蜡切片,HE染色,作常规病理组织学诊断,一部分作冰冻切片的直接法免疫荧光染色。荧光抗体用抗人IgG、IgA、IgM和补体C3分别染切片。同时作对照试验。
(2)间接法:用病人血清与食道等抗原切片反应后,分别用抗人IgG、IgA、IgM荧光抗体染色阳性结果,可以进一步作滴度检测。同时作对照试验。
3.荧光显微镜检查直接法检测结果可见疱疹性皮肤病中各有一定的荧光形态,可见免疫球蛋白的沉积。
刘荣卿等(1987)用直接免疫荧光组织化学方法,对临床拟诊为天疱疮或大疱性类天疱疮病例进行检查,活检取病变附“正常”皮肤标本,用羊抗人IgG、IgM、IgA及C3荧光抗体染色,结果可见天疱疮9例中,取自“正常”组织标本均见表皮细胞间有IgG沉积,1例并有IgM、IgA,2例有C3,7例毛囊上皮和(或)汗腺上皮细胞间有IgG、IgM、IgA、C3沉积。用间接免疫荧光检测8例均阳性,大疱性类天疱疮8例中,取自“正常”皮肤标本均阳性,主要为基底膜出现IgG(7例),C3(8例),1例为IgM,1例伴有IgA。天疱疮及大疱性类天疱疮均为自身免疫性疾病,皮肤及血液中分别存在抗表皮细胞表面抗体、天疱疮抗体及抗基底膜抗体-类天疱疮抗体,这些自身抗体结合在皮肤、粘膜的相应部位。
不同疱疮性皮肤病的间接荧光图形如表15-8
表15-8 皮肤抗体阳性荧光分布
(Clinical Immunology P146, 1971)
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