（1）根据当地钩端螺旋体的型别制备多价抗体、标记FITC制成荧光抗体。

（2）检查方法：

①血液标本的检查：取发热期的病人或发病动物的血液约2ml，制取血浆，并加入钾明矾（0.058g/ml），振荡混匀后置室温10～15min，然后中速离心沉淀，取沉渣涂片，晾干，95%酒精固定。免疫荧光染色，镜检。

②尿液标本检查：取病人或动物尿液约2～3ml，高速离心，取沉渣涂片，无水乙醇固定，免疫荧光染色，镜检。

③脏器标本的检查：取发病动物的肾脏皮质部分，以刀片切出整齐断面，滤纸吸去血液，再以洁净载玻片压印制片，晾干后以丙酮在4℃固定。经10%甲醛固定的组织可作冰冻切片，依丙酮-乙醇-甲醇的次序固定，荧光抗体染色前以3%表面活性剂如Tween20处理切片，据称，这样可使荧光强度增加4倍。

④培养液检查：同尿处理。

⑤特异性抗体的检查：用适当血清型的钩端螺旋体作抗原，用间接法检查病人血清中的特异性抗体，可用于流行病学调查和临床追溯诊断。此检查适用于人类和家畜等。

本法诊断钩端螺旋体，一般只具有属的特异性，鉴定抗体则可能达到型的特异性。